Ус, хөрс, агаарын судалгааны Микробиологийн арга

Бичил организмууд - жижигхэн, ихэнх нь нэг эст амьтад, байгальд өргөн тархсан байдаг. Тэд ургамал, хүн, малын бүх мэдээллийн хэрэгсэл (агаар, хөрс, ус) олдсон байна.

Чанарын олон янз байдал ба организмын тоо хоол тэжээлийн бодисууд дээр үндсэндээ хамаарна. Гэхдээ энэ нь бас чийгшил, температур, агааржуулалт болон нарны гэрэл болон бусад хүчин зүйлийн арга хэмжээ чухал ач холбогдолтой юм.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. эрүүл ахуй, микробиологийн судалгаа нь байгалийн хэвлэл мэдээллийн арга эмгэг байгаа эсэхийг илрүүлэх боломжтой бөгөөд зөөх, эсвэл халдварт өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээг боловсруулах, гаргаж авсан үр заасны дагуу өөрсдийн хэмжээг тодорхойлох. Үүнээс гадна, тоон данс экосистемийн загварчлал, засаглалын байгалийн үйл явцын хөгжилд хэрэгтэй байдаг. . АНУ-ын Микробиологийн шинжилгээний арга нь юу цаашид авч үзье.

хөрсний

Энэ нь халдварт эмгэг дамжуулах боломжтой чиглэлийн нэг гэж эрдэмтэд үздэг. хөрс нэвт өвчин үүсгэгчийг шүүрэл хүн, мал, амьтны өвчтөнд нь. Тэдний зарим нь, тухайлбал, спорын онд удаан хугацаанд (заримдаа хэдэн арван жилийн турш) нь хөрсөнд байсаар болно. позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Ийм татран, боом, botulism, гэх мэт хөрсний намар эмгэг төрүүлэгчид тийм аюултай халдвар. хөрсний ариун цэврийн-микробиологийн судалгааны аргууд Хэрэв та "бичил биетний тоог" (нэг грамм нь хөрсөн дэх бичил биетний тоо) болон савханцрын индекс (савханцрын тоо) тодорхойлох боломж .

Хөрсний шинжилгээ: тойм

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. хөрсний микробиологийн шинжилгээний арга нь үндсэндээ хатуу шууд харуур болон сг холбоотой байх ёстой шим тэжээлт. бичил биетэн, тэдгээрийн бүлэг хөрс амьдардаг, популяцийн тоо толгой ангилал зүйн байдал, экологийн чиг үүргийн талаар ялгаатай. шинжлэх ухаан, тэд ерөнхий нэр томъёо дор нэгдэж байна "хөрсний амьд байгаль." Гарын авлагаас - бичил биетний амьдрах орчин нь асар их тоо. хөрсний граммаар тэдний эсийн 1 10 тэрбум хүртэл байх юм. Энэ орчинд идэвхтэй янз бүрийн saprophytic бичил биетний оролцоотойгоор органик бодисын задрал, авдаг.

Микробиологийн аргаар бичил судалгаа: алхмууд

Дунд шинжилгээ дээж эхэлдэг. Энэ зорилгоор өмнө нь хальсалж сараалжтай архи хутга (экскаватор ашиглаж болно). Үүний дараа, дээжлэх. Дараагийн алхам бол - эсүүд нь будсан т рхэц тоолох. алхам бүрийг тус тусад нь авч үзье.

Дээж авах

Хөдөө аж ахуйн хөрс шинжилгээний бүх давхаргын гүнд авсан дээжийг хандлагатай байдаг. Нэгдүгээрт, газраас дээш 2-3 см-ийн арилгаж энэ нь гадны бичил-д байж болох юм. Цаашид газрын талбайтай monoliths авч судалсан. Тэдний тус бүрийн урт нь та дээж хүсэж байгаа нь давхаргын зузаан нь нийцсэн байх ёстой.

100-200 хавтгай дөрвөлжин нь газар дээр. 7-10 м-ийн сонгосон дээж. тус бүрийн жин - 0.5 кг зорилгоор байна. дээж уутанд сайтар хольж байх ёстой. Дараа нь ойролцоогоор 1 кг жинтэй дундаж дээжийг авна. Энэ нь даавуун уутанд хаалттай илгэн (ариун) багц байрлуулсан байх ёстой. хөргөгчинд хадгалсан дээжийн шинжилгээ чиглүүлэх өмнө.

Судалгааны бэлтгэх

өдөөгдөж хөрс хуурай шилэн дээр асгасан. спиртээр Түүний өмнөх арчиж, шарагчийн дээр шарж болно. нь хусуур хөрс нь сайтар хольж, жигд өргөтгөсөн. Энэ нь үндэс болон бусад гадаад элементүүдийг устгах зайлшгүй шаардлагатай юм. Үүнийг хийхийн тулд хясаа ашиглаж байна. шарагчийн Дээрх үйл ажиллагаа хясаа болон хусуур гал авалцаж, сэрүүн эрхтэй өмнө.

шилэн дээр тархсан янз бүрийн хөрс газрыг, жижиг хэсгийг сонгосон байна. Тэд техникийн хэмжээнд нь шаазан таваг жинтэй. является специальная обработка образца. микробиологийн судалгаа заавал алхам бичил арга нь дээж тусгай боловсруулах юм. 2 урьдчилгаа, ариутгасан саванд хийж бэлтгэсэн байх ёстой. Тэдний хэмжээ 250 мл-ийн хэтрэхгүй байх ёстой. колбонд нэг цорго 100 мл усанд цутгана байна. Энэ нь хөрсний 0.4-0.8 мл шингэн дээжийг авч, нэг зуурмаг норгосон учраас. холимог 5 минутын турш хуруу болон резинэн Pestle нь илж байх ёстой.

Эхний колбонд усны хөрсний масс нь хоосон колбонд шилжүүлж байна. Цаашилбал, түүний нуруугаа зурж. энэ масс шарагч дөл ойролцоох колбонд шилжүүлж дараа. хөрсний түдгэлзүүлэх нь Чингэлэг 5 минут нь сэгсрэгч дээр ганхаж байна. Түүнээс хойш энэ нь 30 орчим секунд шийдвэрлэх эрхтэй байсан. Энэ зорилгоор их хэмжээний тоосонцор шийдвэрлэх боломжийг олгох хэрэгтэй байна. хагас минут масс бэлтгэл бэлтгэх ашиглаж байна дараа.

тогтмол т рхэц-нд Гар тоо

, разработанному Виноградским. хөрсний Шууд бичил судалгаа Vinogradskii боловсруулсан микробиологийн судалгааны аргаар явуулж байна. түдгэлзүүлэх тодорхой хэмжээний бичил биетний эсийн тоог тоологдсон. тогтмол т рхэц судлах нь урт хугацаанд мансууруулах бодис хадгалж, ямар ч үед тооцоог хийх болно.

эм бэлтгэх гэх мэт дагадаг. зутан (ихэвчлэн 0.02-0.05 мл) нь тодорхой хэмжээний Слайдан дээр нь micropipette нь хэрэглэж байна. Энэ шийдэл нь агар-агар дусал нэмсэн тулд (хольц agaropectin полисахарид ба үүнийгээ агарос бор, улаан замаг Хар тэнгисээс олборлож), хурдан өдөөгдөж бас талбайг 4-6 кв тархсан. см-ийн. Пап агаарын хатааж, 20-30 минут тогтмол. архи (96%). Дараа нь, эмийн нэрмэл усаар норгосон болон P-р carbolic erythrosine 20-30 мин-д тавьжээ.

будалтаар дараа угааж, агаарт хатаасан байна. Гар тоо суух линз нь гүйцэтгэсэн байна.

Хатуу тэжээлт орчин дээр Тариалах

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Микробиологийн шинжилгээнд зориулан бичил арга бичил биетний олон тооны илрүүлж болно. Харин ч энэ нь арга тарих практикт хамгийн түгээмэл байдаг. Түүний мөн чанар нь хатуу тэжээлт дээр Петрийн аяганд нь мансууруулах бодис (хөрсний түдгэлзүүлэх) хэмжээг үрийн бүрддэг.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. микробиологийн эрдэм шинжилгээний энэ арга нь дансанд нь зөвхөн тоо хэмжээг ч бүлэг, зарим тохиолдолд, мөн бичил ургамлын зүйлийн бүрэлдэхүүнийг авдаг. ихэвчлэн халдварладаг гэрэлд петрийн аяганд ёроолоос үйлдвэрлэсэн колоний тоог тоолох. тооцоолсон талбай дээр нь маркер буюу бэх цэг тавьжээ.

усны шинжилгээ

Ус биеийн бичил, ёс мэт үүн орчмын хөрсний бичил биетний бүтэц харуулж байна. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Энэ утгаараа, ус, хөрсний ариун цэврийн-микробиологийн шинжилгээний арга нь тухайн экосистемийн улсын судалгаанд тодорхой практик ач холбогдолтой юм. цэвэр усны дүрэм, Коккууд, саваа хэлбэрийн бактер зэрэг агуулж байдаг.

усанд анаеробууд бага хэмжээгээр илэрсэн. Дүрмээр бол тэд ус байгууллагын доод талд, шавар, цэвэршүүлэх үйл явцад оролцож үржүүлнэ. Бичил далай болон тэнгис advantageously halophytic (halophilic) бактери эзэлж байна.

ус нь гүний худаг бараг ямар ч бичил биетэн юм. Энэ нь хөрсний давхаргын шүүх хүчин чадалтай холбоотой юм.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Микробиологийн Усны судалгааны Уламжлалт арга бичил биетний болон савханцрын-титр, эсвэл хэрэв-индекс тодорхойлолтыг авч үзсэн. Эхний үзүүлэлт нь 1 мл шингэн дэх нянгийн тоог тодорхойлно. Коли индекс ус литр өнөөгийн coliforms тоог илэрхийлдэг бөгөөд титр бол - хамгийн бага тоо юм уу эсвэл тэд одоо ч илэрсэн байж болох хамгийн их шингэлэх шингэн.

микробын тоо хэмжээг тодорхойлох

Ус Энэ арга нь ариун цэврийн микробиологийн шинжилгээ нь дараах байдалтай байна. ус 1 мл mesophilic болон facultative анаеробууд (завсрын) тоог тодорхойлсон 37 DEG дээр мах пептоны агар (анхдагч дунд) дээр чадвартай aerobes байна. өдрийн турш 2-5 р нь томруулж дээр харагдах колони үүсгэдэг байна. эсвэл нүцгэн нүд.

является посев. усны микробиологийн шинжилгээний аргын гол алхам нь тариалсан байна. Учир нь дээж тус бүр наад зах нь 2 өөр хэмжээгээр тариалсан байна. аяга тус бүрт усны цорго шинжилгээ цэвэр шингэн 1-0.1 мл хийж, 0.01-0.001 мл-ийн бохирдсон үед. 0.1 мл, эсвэл шингэн бага хэмжээгээр тарих нь нэрмэл (ариун) усаар шингэлж байна. Тууштай аравтын шингэрүүлэлт бэлтгэх. Тэдний тус бүр 1 мл хоёр петрийн аяганд хийсэн байна.

шим тэжээлийн агар дүүрэн аж ахуй. Энэ нь анх удаа хайлж, 45 DEG сэрүүн байх ёстой. хутгах дараа идэвхтэй дунд хатуужилтаас нь хэвтээ гадаргуу дээр үлдсэн байдаг. 37 градус байна. үр тариа өдрийн турш өссөн байна. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Микробиологийн усны судалгаа авч аргыг харгалзан эдгээр хоол үр дүнг авдаг бол 30-300-ын хүрээн дэх колоний тоо.

агаар

Энэ нь бичил биетний хувьд дамжин өнгөрөх газар гэж үзэж байна. являются седиментация (оседание) и аспирация. микробиологийн судалгаа гол арга агаарын тунадас (шийдвэрлэх) ба хүсэл тэмүүлэл байдаг.

Бичил агаарын орчин дур мэдэн хувьсах болон тогтмол хуваагддаг. Эхний бүлэг нь мөөгөнцрийн, chromogenic Коккууд, спорын агуулсан Bacillus савханцрын, хатаах, гэрэлд өртөх тэсвэртэй байдаг бусад бичил биетнийг багтана. Төлөөлөгчдийн хувьсагч нь бичил, тэдний ердийн амьдрах орчин нь агаарт нэвтэрч, урт нь тэдний амьдрах чадвар хадгална.

томоохон хотуудын агаарт хөдөө орон нутагт агаарын орчинд илүү бичил биетэн. далайд гаруй, ой мод маш цөөн нян байдаг. цас, бороо: агаар цэвэршүүлэх хур тунадас дөхөм болох юм. Дотор нян нээлттэй орон зайд илүү. Тэдний тоо тогтмол агааржуулалт байхгүй өвөл нэмэгдсэн байна.

тунах

считается простейшим. нян судлалд микробиологийн эрдэм шинжилгээний энэ арга нь хамгийн энгийн байх ёстой гэж үзэж байна. Энэ нь хүндийн дор нээлттэй Петрийн аяганд нь агарын гадаргуу дээр дусал болон хэсгүүд шийдвэрлэх дээр суурилсан байна. тунах арга нь үнэн зөв агаар дахь нянгийн тоог тодорхойлж болохгүй. баримт нээлттэй аяга бактерийн маш хэцүү тоос тоосонцор болон дусал нарийн хэсгийг барьж байгаа юм. гадаргуу дээр ихэвчлэн их хэмжээний тоосонцор үлдээсэн.

Энэ арга нь агаарын шинжилгээнд ашигласан байна. Энэ нь байгаль орчны агаарын урсгалын хурд их хэлбэлзэл тодорхойлогддог. Тунгаагч Гэхдээ илүү боловсронгуй төхөөрөмжүүд болон цахилгаан эрчим хүчний эх үүсвэр байхгүй үед хэрэглэж болно.

Omelyansky аргаар гүйцэтгэсэн микробын тоог тодорхойлох. нийцүүлэн, 100 хавтгай дөрвөлжин агар гадаргуугийн талбай дээр 5 минут. см-ийн нянгийн тоо агаар нь 10 литр байх юм зохицуулна.

Захиалах 535 "мөрдөн микробиологийн арга нэгдэх тухай"

Бактериологийн шинжилгээ хийх нь төрөл бүрийн халдварт өвчин оношлох, урьдчилан сэргийлэх, эмчлэх чиглэсэн цогц, эмнэлзүйн ба лабораторийн үйл ажиллагаанд чухал байр эзэлдэг. Гэсэн хэдий ч, байгаль орчны судалгаа, тэдгээр нь хязгаарлагдмал байна.

онцгой ач холбогдолтой эмнэлэгт биологийн материалын бактериологийн шинжилгээ юм. эрүүл мэндийн байгууллагуудад хийсэн судалгааны хувьд хайсан нэмэгдсэн байна. "Мөрдөн микробиологийн арга нэгдэх тухай" тушаалаар зорилго нь микробиологийн оношлогоо чанар, үр ашгийг сайжруулах, нян судлалын шинжилгээг сайжруулах явдал юм.

эмэгтэй Т рхэцийн бичил харуурын шинжилгээ

Энэ нь халдвар, бэлгийн замаар дамжих халдвар, мөн оппортунист халдвар (оппортунист нян) оношлох шинжилгээний гол арга юм.

Бичил дүн шинжилгээ хийх, микрофлорын тоон болон чанарын найрлагыг үнэлэх дээж үнэн зөв шалгах хэрэгтэй. Жишээ нь, умайн хүзүүний суваг авсан арчдасыг нь үтрээний хучуур байх нь биологийн дээжийн сонгох дүрэм зөрчсөн харуулж байна.

Энэ тохиолдолд микробиологийн шинжилгээ ерөнхийдөө зарим асуудлуудыг дараа гэж ярьдаг. Тэд бага бэлгийн замын хэвийн янз бүрийн насны үед харилцан адилгүй олон төрлийн бичил танилцуулж байна байгаатай холбоотой байна. судалгааны үр ашгийг сайжруулах, стандарт дүрэм журмыг боловсруулсан байна.

Вирусын халдварын оношлогоо

Энэ нь РНХ болон ДНХ-ийн эмгэг илрүүлэх аргаар явуулж байна. Тэд гол төлөв эмгэг материал нуклеотидын дарааллыг тодорхойлох дээр үндэслэсэн байдаг. Энэ зорилгоор, молекулын шалгалтуудыг. Тэд хиймлээр (нэмэлт) цацраг идэвхт шошго буюу биотин нь хаяглагдсан вирусын хүчил нэмэлт нуклейн хүчил үйлдвэрлэж байна.

аргын онцлог нь хэдэн зуун агуулсан өвөрмөц ДНХ-ийн фрагментийг хуулж давтан (эсвэл хэдэн арван) хос нуклеотид. хуулбар (хуулбар) гэсэн өргөтгөл зөвхөн зарим нэг нэгжээр эхэлж болох юм. праймер (праймер) тэднийг үүсгэхэд ашиглагддаг. Тэд нийлэгжсэн Олигонуклеотидууд байна.

ПГУ-ын оношлогоо (полимеразын гинжин урвал) гүйцэтгэхэд хялбар юм. Энэ арга нь та хурдан эмгэг материалын бага хэмжээний ашиглан үр дүнг авах боломжийг олгодог. ПГУ-ын оношлогоо ашиглах нь цочмог, архаг болон далд (далд) халдвар тодорхойлсон.

Энэ аргын мэдрэмжийн илүү тохиромжтой гэж үздэг бол. Гэсэн хэдий ч, одоогийн тест систем байхгүй найдвартай хангалттай, ПГУ-ын онош бүрэн уламжлалт аргыг сольж чадахгүй байгаа болохоор байна.